Мікробіологічна безпека кратому: тести й ліміти

Стисло

Мікробіологічна безпека рослинної сировини оцінюється за чотирма основними параметрами: TAMC (загальне число аеробних мікроорганізмів), TYMC (загальне число дріжджів і цвілі) і присутність специфічних патогенів Escherichia coli і Salmonella spp. Референсною рамкою є Європейська фармакопея (Ph. Eur.) глава 5.1.4 і USP <2021>.

Що відстежується

TAMC (Total Aerobic Microbial Count)

Загальне число аеробних мікроорганізмів (бактерій) в одному грамі зразка, виражене в КУО/г (colony-forming units per gram). Індикує загальну мікробіологічну чистоту матеріалу.

TYMC (Total Yeast and Mold Count)

Загальне число дріжджів і цвілі в одному грамі зразка, у КУО/г. Високий TYMC пов'язаний із ризиком виникнення мікотоксинів - тому TYMC є важливим профілактичним показником.

Специфічні патогени

• Escherichia coli - індикатор фекальної контамінації; у рослинної сировини до розповсюдження зазвичай вимагається відсутність у визначеній кількості зразка (наприклад, 1 г),
• Salmonella spp. - патогенна бактерія; стандартно вимагається відсутність у 10 г зразка.

Необов'язково, залежно від призначення матеріалу, тестують й інші патогени (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus).

Ліміти згідно з EuPh 5.1.4

Європейська фармакопея встановлює ліміти залежно від категорії використання сировини. Для перорального використання в рослинної сировини (категорія B) орієнтовні ліміти:

• TAMC: ≤ 10⁷ КУО/г (тобто максимум 10 мільйонів КУО на грам),
• TYMC: ≤ 10⁵ КУО/г (тобто максимум 100 тисяч КУО на грам),
• відсутність Salmonella у 25 г,
• відсутність E. coli у 1 г.

Для рослинної сировини з передбачуваною якіснішою обробкою (категорія A) ліміти суворіші (TAMC ≤ 10⁵ КУО/г). Конкретне віднесення кратому до категорії залежить від призначення використання, зазначеного в документації.

Причини контамінації

Основні джерела мікробіологічної контамінації в ланцюгу кратому:

• Збір - контакт із ґрунтом, комахами, птахами,
• Сушіння - сушіння в нечистому середовищі, недостатнє провітрювання, контакт із контамінованими поверхнями,
• Ферментація - якщо відбувається в незадовільних умовах, сприяє розвитку цвілі,
• Зберігання й перевезення - вологість, висока температура, контаміновані мішки,
• Вторинна контамінація під час пакування - контакт із персоналом, недостатньо дезінфіковані інструменти.

Профілактика контамінації є передусім питанням гігієнічної дисципліни в усій виробничій лінії, а не лише фінального аналізу.

Метод детекції

Стандартний мікробіологічний аналіз використовує культивування на селективних агарах:

• TAMC - Tryptic Soy Agar (TSA), інкубація 30-35 °C, 3-5 днів,
• TYMC - Sabouraud Dextrose Agar (SDA), інкубація 20-25 °C, 5-7 днів,
• E. coli - MacConkey Agar / EMB з підтвердженням біохімічними тестами,
• Salmonella - селективне збагачення (RV бульйон) + висів на XLD/Hektoen агар + серологічне підтвердження.

Сучасні лабораторії використовують і молекулярні методи (ПЛР, MALDI-TOF) для швидшої ідентифікації.

Часті запитання

Чи можна стерилізувати кратом опроміненням?

Деякі типи гамма-опромінення використовуються для мікробіологічної деконтамінації спецій і рослинної сировини. Вплив на вміст алкалоїдів у кратому, однак, недостатньо вивчений; крім того, у ЄС опромінення продуктів харчування підлягає окремому регулюванню (директиви 1999/2/EC, 1999/3/EC).

Що означає TAMC?

Total Aerobic Microbial Count - загальне число аеробних (таких, що потребують кисень) мікроорганізмів в одному грамі зразка, виражене в КУО/г.

Чи є сальмонела частою знахідкою в кратомі?

За дотримання стандартної гігієни - ні. Випадки виявлення з'являються в сировини, обробленої в незадовільних умовах. Стандартом є тест на відсутність у 25 г зразка.

Як пов'язаний TYMC із мікотоксинами?

TYMC вимірює присутність цвілі; сама присутність не означає присутності мікотоксинів, але високий TYMC підвищує ризик їх утворення. Обидва параметри оцінюються спільно.

Джерела

• European Pharmacopoeia, гл. 5.1.4. Microbiological quality of non-sterile pharmaceutical preparations and substances for pharmaceutical use.
• USP <2021>. Microbial Enumeration Tests - Nutritional and Dietary Supplements. United States Pharmacopeia.
• USP <2023>. Microbial Procedures for Absence of Specified Microorganisms - Nutritional and Dietary Supplements.